目的:探讨骨髓间充质干细胞(marrowmesenchymalstromalcells,MSCs)的标记与体内示踪方法,及其治疗椎间盘退变的可行性。方法:取兔MSCs行体外培养,并在体外纯化扩增,用超顺磁性氧化铁(superparamagneticironoxide,SPIO)磁粒子标记后分别于1、3、5、7d用MTT法检测细胞活性。将标记后的细胞植入退变的椎间盘内。分别于2、4、6、8周用间苯三酚分光
光度法测定蛋白多糖含量的变化,免疫组化法测定Ⅱ型胶原含量的变化,用MR扫描对标记干细胞在椎间盘内分布进行示踪。所得数据进行统计学处理。结果:MTT法结果显示,SPIO对MSCs的生物活性无影响,MSCs能被SPIO有效标记。运用MR扫描可观察到其在体内的分布,并发现干细胞向周边发生了迁徙。8周内实验组髓核蛋白多糖和Ⅱ型胶原的含量高于模型组,差异有统计学意义。结论:SPIO可有效地标记MSCs并行体内活体示踪,且不影响细胞活性,是理想的示踪剂。SPIO标记后的MSCs移植能增加髓核中细胞外基质的含量,从而延缓椎间盘退变。 |