目的:观察体外培养的大鼠肝细胞在促炎细胞因子IL1β刺激下一氧化氮(NO)的产生和线粒体膜电位的变化,探讨两者之间的关系。方法:原位胶原酶灌注法分离和培养原代大鼠肝细胞后,分别用生理盐水、脂多糖(LPS)(10mg·L-1)、IL1β(1nmol·L-1)及LPS(10mg·L-1)联合IL1β(1nmol·L-1)刺激肝细胞,并分别在刺激后6、12、24、48h留取细胞和上清液,采用分光光度法测定上清液NO的含量,采用荧光探针JC1结合流式细胞仪检测肝细胞线粒体膜电位的变化。结果:IL1β刺激后肝细胞产生NO增加而线粒体膜电位降低,两者均呈时间依赖性,并在24h达峰值;LPS对肝细胞NO的合成没有直接诱导作用,与IL1β联合刺激也没有协同作用。结论:IL1β诱导肝细胞过度产生NO从而抑制线粒体呼吸功能可能是炎症应激下肝损伤的潜在机制之一。 |