重组人骨形成蛋白2基因在大肠杆菌中的克隆-东南大学学报医学版

重组人骨形成蛋白2基因在大肠杆菌中的克隆

单位：1.南京大学； 2.南京市口腔医院

分类号：Q785

出版年·卷·期（页码）：2001·20·第三期（158-160）

摘要：

目的:在大肠杆菌中克隆人骨形成蛋白2基因.方法:由人成骨细胞中提取细胞总RNA,利用逆转录PCR方法扩增获得人骨形成蛋白2基因cDNA;将获得基因片段重组到pCI质粒中,转化到大肠杆菌Top10后挑选克隆,利用限制性酶切和核苷酸序列分析鉴定重组质粒.结果:质粒DNA酶切分析及核酸序列分析证实,获得的基因片段为人BMP2全编码序列.结论:克隆获得人骨形成蛋白2基因,为表达骨形成蛋白2奠定了基础.

Objective To clone the human recombined bone morphogenetic protein 2(BMP2) gene in Escherichia coli .Methods The cell total RNA was extracted from human osteoblast cell,the BMP2 cDNA was amplified by RT PCR and then inserted into cloning vector pCI plasmid.The recombined clone was confirmed by restriction enzyme and sequencing analysis.Result Restriction enzyme assay and sequencing showed that the constructed clone contained the BMP2 cDNA.Conclusion Cloning of recombined human BMP2 gene give a basis for further expression study.

参考文献：

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