目的:研究蚯蚓纤溶酶对人胃癌细胞株MGC803抑制增殖及诱导凋亡的作用,并初步探讨蚯蚓纤溶酶诱导凋亡的作用机制.方法:采用MTT法观察蚯蚓纤溶酶对MGC803细胞增殖的影响,DNA凝胶电泳技术观察凋亡细胞变化,流式细胞术观察细胞凋亡率的变化,免疫细胞化学染色法检测蚯蚓纤溶酶对MGC803细胞p53蛋白表达的影响.结果:蚯蚓纤溶酶对胃癌细胞增殖有明显抑制作用,呈剂量依赖性.蚯蚓纤溶酶4 uku·ml-1作用于胃癌细胞48h后,DNA琼脂糖凝胶电泳观察到典型梯状条带.蚯蚓纤溶酶浓度分别为2、4、8 uku·ml-1作用于胃癌细胞48h后均可诱导细胞凋亡,各组细胞凋亡率分别为(29.51±5.54)%、(61.63±7.12)%、(80.82±5.40)%,与对照组相比,凋亡率升高有统计学意义(P<0.01).蚯蚓纤溶酶2、3 uku·ml-1组作用于细胞48 h后,p53蛋白表达减少,平均光强度分别为1.299±0.07、1.203±0.06,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01).结论:蚯蚓纤溶酶在体外可以抑制MGC803细胞增殖,其机制可能与蚯蚓纤溶酶抑制p53蛋白表达并诱导细胞凋亡有关. |