>
网站首页期刊介绍通知公告编 委 会投稿须知电子期刊广告合作联系我们
最新消息:
活性SET7/9融合蛋白表达系统与提纯方法的建立
作者:高丽丽 余卫平 
单位:东南大学
关键词:GST-SET7/9融合蛋白 重组质粒 组蛋白甲基化转移酶 
分类号:
出版年·卷·期(页码):2012·31·第五期(574-576)
摘要:

目的:表达与提纯活性SET7/9融合蛋白质(GST-SET7/9融合蛋白)。方法:以含人SET7/9基因结构域全长cDNA的pCMV-Tag5B-SET7/9质粒为模板,聚合酶链反应法(PCR)扩增获得目的基因片段,将测序正确的目的基因片段经EcoR I与Xho I双酶切,插入载体pGEX-6P-3中,构建重组质粒经转化与IPTG诱导表达,并提纯该融合蛋白质。通过琼脂糖凝胶电泳、DNA测序、SDS-PAGE蛋白电泳法鉴定重组质粒及融合蛋白表达的正确性;并采用组蛋白甲基化转移酶(HMT)测定法鉴定功能。结果:构建了重组质粒pEGX-SET7/9,获得了相对分子质量约为77000纯化融合蛋白质,其CPM值明显高于对照组(P<0.01),且与作用时间呈正相关。结论:构建的重组质粒pEGX-SET7/9可以表达活性GST-SET7/9融合蛋白。

参考文献:
服务与反馈:
文章下载】【发表评论】【查看评论】【加入收藏
提示:您还未登录,请登录!点此登录
您是第 405419 位访问者


copyright ©《东南大学学报(医学版)》编辑部
联系电话:025-83272481 83272483
电子邮件:
bjb@pub.seu.edu.cn

苏ICP备09058364