目的:血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell, VSMC)是泡沫细胞的主要来源之一,在人类心血管疾病中具有重要的作用,而作为重要的遗传学研究模式生物的小鼠血管平滑肌材料有限,因此建立一种简单、高效的小鼠血管平滑肌原代细胞分离培养方法极为重要。方法:分离载脂蛋白E基因敲除小鼠主动脉,组织贴块法获得原代平滑肌细胞,免疫荧光及免疫组化方法检测细胞的纯度和分化状态。结果:培养第3天时, 可见自组织块周围长出少量梭形或长梭形细胞, 至培养2周细胞融合成片, 呈“峰、谷”状生长。肌动蛋白(alpha-smooth muscle actin, alpha-SMA)免疫组化及荧光染色显示,细胞传至第6代后纯度在98%以上。证实应用此方法分离原代VSMC可以满足平滑肌体外功能实验的需求。结论:应用组织贴块法培养小鼠血管平滑肌细胞, 操作简单, 结果稳定, 纯度较高, 具有推广应用价值。 |