目的:通过化学合成方法制作金属基质蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9, MMP- 9)单克隆抗体超微超顺磁性氧化铁(superparamagnetic iron oxide,SPIO)粒子MR分子探针,并探讨其作为MR特异性分子探针示踪剂使动脉粥样硬化成像的可行性。方法: 采用EDC (1-ethyl-3-[3-dimethylaminopropyl] carbodiimide hydrochloride)化学连接剂将MMP-9单克隆抗体与DMSA [meso-2,3-dimercaptosuccinic acid,(HOOCCH(SH)-CH (SH)-COOH) ]修饰的SPIO相结合,形成具有免疫学活性的MR分子探针。通过间接酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测其免疫活性及生物稳定性。采用高脂饲料喂养ApoE-/-小鼠结合机械损伤的方法,建立小鼠左侧颈动脉粥样硬化模型。将MR磁性粒子探针(Ab-SPIO)经小鼠尾静脉注射(45mgFe/kg),分别于0、4、6、24、48小时对小鼠颈部行7.0T MR扫描检查。结果: 向0.05mg的SPIO溶液中加入不同质量的单克隆抗体, ELISA试验所得的生成物MMP-9单克隆抗体超微超顺磁性纳米颗粒(Ab-SPIO)吸光度值随抗体含量增加而增大,与阴性对照SPIO组(未加单克隆抗体)相比较差异显著( P <0.05) ,分别间隔3天及100天后再次测量,100μg及200μg单抗组吸光度值降低( P <0.05)。经小鼠尾静脉注射磁性粒子探针后6小时,损伤侧颈动脉斑块管壁信号于T2WI像上降低最显著,管腔呈“假性扩大样”改变。结论: EDC化学方法可制备出单克隆抗体超微超顺磁性氧化铁粒子,同时仍具有抗体的免疫学活性及生物稳定性。该合成物可以作为MR分子探针在体显像小鼠颈动脉粥样硬化斑块,为动脉粥样硬化斑块的分子成像提供了实验依据。 |