目的:在细胞水平观察二甲双胍(Metformin)对晚期糖基化终产物(advanced glycation end products, AGEs)诱导的血管平滑肌细胞((Vascular smooth muscle cells,VSMCs)钙化的抑制作用。方法:应用大鼠血管平滑肌细胞株(A7R5)进行体外实验,分别设对照组、牛血清白蛋白(bovine serum albumin BSA)组、AGE-BSA组、二甲双胍与AGE-BSA共干预组。将200 mg•L - 1 AGE-BSA和不同浓度(10- 4 mol•L-1 、510-5 mol•L-1 、10- 5 mol•L – 1 )二甲双胍在含10 mmol•L -1 β-甘油磷酸的钙化培养液中共培养血管平滑肌细胞,观察不同浓度二甲双胍对血管平滑肌细胞钙化的影响。用全自动生化分析仪测定细胞层钙含量;采用磷酸苯二钠法检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase ,ALP)活性;RT-PCR 检测骨形成蛋白-2(bone morphogenetic protein-2, BMP-2) mRNA 表达;Western blotting检测BMP-2蛋白表达。结果:与对照组相比,AGE-BSA组细胞层钙含量增加、碱性磷酸酶活性升高,细胞BMP-2 mRNA 表达升高,BMP-2 蛋白表达增加( P < 0. 01) ; 不同浓度二甲双胍与AGE-BSA组共干预可降低AGEs诱导的上述指标升高。结论: AGE-BSA可促进血管平滑肌细胞钙化,二甲双胍可剂量依赖性地抑制AGE –BSA诱导的钙化促进作用。 |